Akademik Veri Yönetim Sistemi
Görmez G. (Yürütücü), Dede S., Yüksek V., Gümüş S.
Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, BAP Araştırma Projesi, 2021 - 2023
(ATCC® CCL-185™) akciğer kanseri hücre serileri ile WI-38 (ATCC® CCL-75™) normal akciğer hücre serisi kullanılarak, anti-kanser özelliğinin ve güvenirliğinin değerlendirilmesi amacıyla tedavi edici ajan veya ilaç etken maddesi olma potansiyeli in vitro olarak araştırılacaktır. Mespilus germenica bitkisi sıvı azotla muamele edildikten sonra liyofilize edilecektir. Liyofilize bitki örnekleri çeşitli kimyasallarla birtakım işlemlere tabi tutulduktan sonra ekstre edilecektir. Ekstreler, içerdikleri toksik çözeltilerden arınması için evaporatörde işleme tabi tutulacaktır. Elde edilen kuru madde tekrar liyofilize edilerek -20ºC de, çalışmalarda kullanılıncaya kadar muhafaza edilecektir. Araştırmada kullanılacak hücre serileri; 37oC, %5 CO2 ve %95 nem içeren ortamda, %10 FBS, %1 Lglutamin ve %1 penisilin/streptomisin medyum besi yerinde çoğaltıldıktan sonra, hücreye uygulanacak ekstraktın proliferasyonun yarısını inhibe (IC50) edecekkonsantrasyonu belirlenmesi için MMT testi uygulanacaktır. Oluşturulan çalışma gruplarındaki hücrelere, ekstraksiyon uygulanmadan önce serum açlığı (serum starvation) yapılacaktır. IC50 ekstrakt uygulanan çalışma gruplarındaki hücre ölümleri takip edilerek hücre ölümleri başlayınca bütün gruplarda total RNA eldesine geçilecektir. İzole edilen mRNA’lar ticari cDNA sentez kiti kullanılarak cDNA’ya dönüştürüldükten sonra, RealTime-PCR’da gen ekspresyon paternleri saptanacaktır. Gruplar arasındaki farklılık kontrol genin(GAPDH) ekspresyonun artış-azalış kat (fold changes) sayısı ile karşılaştırılıp değerlendirilecektir. Yapılacak bu çalışmayla ilaç etken maddesi olma potansiyeline sahip bu formülasyonun kanser tedavisinde kullanım ihtimali in vitro şartlarda araştırılarak ilaç olarak kullanılabilmesi için birinci faz in vitro çalışmaları tamamlanmış olacaktır. Elde edilen sonuçlara göre in vivo çalışmalar planlanacaktır. Anahtar Kelimeler Mespilus germenica, fenolik madde, HPLC, DNA hasarı, Apoptozis, MMT testi, Real Time-PCR