Mikroalglerin yağ miktarlarının belirlenmesi için uygun florasan metodun geliştirilmesi ve bunun biyodizel üretiminde kullanılması


Creative Commons License

Onay M. (Yürütücü), Şapcı Ayas Z.

Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, 2017 - 2019

  • Proje Türü: Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje
  • Başlama Tarihi: Mayıs 2017
  • Bitiş Tarihi: Aralık 2019

Proje Özeti

Üçüncü nesil biyoyakıt olan mikroalgler bugünlerde büyük popülariteye sahiptir. Mikroalgler biyodizel üretimi için kuru ağırlığının %80’ine kadar yağ içerebilirler. Yağ özütleme için geleneksel metot organik çözücü özütleme metodudur. Bu metod oldukça kesin sonuçlar verse de uzun vakit, yoğun iş gücüne ve biyokütlenin en az 15 mg’ına ihtiyaç duyar. Bu çalışmada, biz mikroalg suşlarının yağ oranlarını daha hızlı verimle çalışan bir metotla inceledik. Nil kırmızısı yağda çözünen floresan bir boyadır ve mikroalglerin hücre içi yağ oranlarını belirleyebilir. İlk olarak, biz mikroalgleri 4 farklı besiyeri Tris-Asetat-Fosfat (TAP), D besiyeri, BBM and BG-11 içerisinde kültürledik. TAP ve BBM en yüksek büyüme hızına (5-5.5 gün) ve biyokütle konsantrasyonuna sahipti (755 mg/mL and 733 mg/mL). Daha sonra biz mikroalglere daha yüksek yağ miktarı elde etmek için rastgele UV mutajenez uyguladık. Bunun sonucunda kontrol tip (% 28) ile karşılaştırdığımızda daha yüksek biyokütle konsantrasyonu (0.78-1.39 g/L) ve yağ miktarına (21-34%) sahip 33 adet suş elde ettik. Mutant suşların yağ verimleri sırasıyla 0.065, 0.076, 0.058, 0.076, 0.084 ve 0.078 g/L/gün olarak bulundu. Bu oran kontrol grubundan iki kat daha yüksekti. Ayrıca, biz yağların yüksek verimle belirlenmesi için Nil kırmızısı konsantrasyonunu 1 µg/mL, inkübasyon zamanını 15 dakika, aseton miktarını % 1, hücre sayısını 8x106 ve EDTA konsantrasyonunu % 2 optimum şartlar olarak bulduk. Buna ek olarak, biz mutant ve kontrol grubu suşları için yağ asidi metil ester (Palmitik asit metil ester (16:0), Linoleik asit (18:2) ve Linolenik asit metil ester (18:3) konsantrasyonlarının değiştiğini belirledik.