İn-vitro ortamda farkli kaynaklardan elde edilen mezenkimal kök hücrelerde muskarinik reseptörlerin gösterilmesi ve reseptör blokajinin farklilaşmaya etkisi


Dr. Öğr. Üyesi Ares Alizade

Tez Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Çukurova Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Dahili Tıp Bilimleri, Türkiye

Tez Danışmanı: Fazilet Aksu

Tezin Onay Tarihi: 2014

Tezin Dili: Türkçe

Desteklendiği Program: Diğer

Özet:

İn-Vitro Ortamda Farkli Kaynaklardan Elde Edilen Mezenkimal Kök HücrelerdeMuskarinik Reseptörlerin Gösterilmesi ve Reseptör Blokajinin Farklilaşmaya EtkisiHücreler birbirleri ile endojen maddeler ve reseptörleri aracılığı ile iletişimkurarak fonksiyonel aktivitelerini yerine getirirler. Rejenerasyon amacıyla nakliyapılan   kök   hücrelerin   de   yerleştikleri   yeni   dokuda   dokunun   gerektirdiğifonksiyonel   aktiviteleri   göstermeleri   uygun   reseptörleri   hücre   yüzeylerindetaşımaları ile mümkün olabilir. Mezenkimal kök hücrelerde hangi reseptörlerinbulunduğunun   gösterilmesi   bu   hücrelerin   rejenerasyon   amacıyla   daha   uygunkullanılmasını sağlayacaktır. Bu çalışmada insan plasenta fetal membranı (FM) ve kemik iliğinden (Kİ)elde edilen MKH'lerde, 1., 2. ve 3. pasajda, osteojenik, adipojenik farklılaşmada,ek olarak atropin etkisindeki farklılaşmada, muskarinik reseptörlerin M1, M2,M3, M4, M5alt gruplarının mRNA ekspresyon düzeyleri RT-qPCR ile  gösterildi.Blokörlerin  farklılaşmaya   etkisinin  tespit  edilmesi   amacıyla  osteojenik     açıdanBone   Morphogenetic   Protein   (BMP-6)   ve   Peroxisome   Proliferator-ActivatedReceptor Gamma (PPARγ), adipojenik açıdan PPARγ mRNA ekspresyonları daRT-qPCR ile araştırıldı.Çalışmamızda,   kontrol   grubuna   göre,   M1   mRNA   ekspresyonunda   FMgruplarında genel olarak anlamlı bir artış saptandı. Farklı olarak bu durum  Kİgrupları için azalma yönünde görüldü. M5 mRNA ekspresyonu yönünden kontrolegöre FM gruplarında anlamlı değişiklikler bulunmadı fakat aynı reseptörün Kİgruplarında   anlamlı   azalma   yönünden   sonuçlar   elde   edildi.     Osteojenikfarklılaşmış   hücrelerde   FM   ve   Kİ   gruplarında   BMP-6   mRNA   ekspresyonları,farklılaşmamış   hücrelere   göre   anlamlı   derecede   artış   gösterdi   fakat,   atropinetkisinde osteojenik farklılaşan hücrelerde, normal osteojenik farklılaşmış grubagöre   BMP-6   mRNA   ekspresyonlarında   anlamlı   fark   saptanmadı.   Her   ikikaynaktan   elde   edilen   gruplarda   adipojenik   farklılaşmış   hücrelerde   PPARγmRNA   ekspresyonlarında   kontrol   grubuna   göre   anlamlı   artışlar   tespit   edidi.Farklı olarak FM grubunda atropin etkisinde farklılaşan hücre grubu, normaladipojenik   farklılaşan   gruba   göre   ekspresyonda   anlamlı   olmasa   da   artışgösterirken, Kİ için bu durum azalma yönünde saptandı. Bu   sonuçlar   muskarinik   reseptörlerin   ekspresyonları   yönünden   farklıkaynaklardan elde edilen hücrelerin farklı davrandıklarını ve aynı kaynaktan olanhücrelerde de pasaj ve farklılaşmalara göre değişiklikler olduğunu göstermektedir.Bu nedenle klinik amaçlı kullanılan bu hücrelerin daha etkili kullanılmaları içinfarklı kaynaklardan ve aynı kaynaktan farklı pasajlardan elde edilerek in-vivoçalışmalarla muskarinik  reseptör   ve  diğer reseptörler açısından araştırılmalarıönem göstermektedir.