Iğdır elmasından polifenol oksidaz enziminin saflaştırılması ve bazı özelliklerinin incelenmesi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Van Yüzüncü Yıl Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, KİMYA ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2009

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: FİKRET TÜRKAN

Danışman: Halit Demir

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada Iğdır Elması'ndan polifenol oksidaz enzimi (E.C. 1.14.18.1;PPO) afinite kromatografisi yöntemi ile saflaştırılmış ve polifenol oksidaz enziminin çeşitli özellikleri incelenmiştir. Bu çalışma için Iğdır yöresinden elma temin edilmiştir. Iğdır elmasından polifenol oksidaz enzimi saflaştırmak için pH'sı 7.3 olan fosfat tamponu kullanılarak, gerekli santrifüj ve diğer işlemler yapılarak kolona uygulanacak homojenat hazırlanmıştır. Bu homojenat aktifleşmiş Sepharose 4-B-L-tirozin-p-aminobenzoik asit afinite kolonuna uygulanmıştır. Kolondan alınan fraksiyonlardan aktivite gösterenler, kantitatif protein tayinleri için Coomassie Blue yöntemiyle ve 595 nm'de yapılmıştır. Bunun yanı sıra enzimin optimum pH'sı, optimum sıcaklığı, iyonik şiddet etkisi ve bazı kimyasalların inhibisyon etkisi incelenmiştir. Enzimin optimum pH'sı 6.0 , optimum sıcaklığı 50 0C olarak bulundu. Ayrıca iyonik şiddetin etkisi üzerine yapılan çalışmada ise en yüksek aktivite 0.16 M (NH4)2SO4 konsantrasyonunda görülmüştür.Anahtar Kelimeler: Afinite kromatografisi, Iğdır Elması, İnhibisyon, Polifenol oksidaz, Saflaştırma.