Solunum yollarından izole edilen mannheimia haemolytica suşlarının tiplendirilmesi, bazı virulens genleri ile antimikrobiyal maddelere duyarlılıklarının araştırılması.


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Van Yüzüncü Yıl Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Mikrobiyoloji (Veteriner) (Dr), Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2020

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: CİHAT ÖZTÜRK

Danışman: İsmail Hakkı Ekin

Özet:

Amaç: Bu çalışmada sığır ve koyunların solunum yollarından izole edilen Mannheimia (M.) haemolytica izolatlarının biyotipleri ve bazı önemli virülens ile ilişkili genlerin dağılımının tespit edilmesi amaçlandı.

Yöntem: Araştırmada 157 sığır ve 182 koyunun nazo-farengiyal ve trake-bronşiyal bölgelerinden alınan toplam 650 svap örneğinin konvansiyonel bakteriyolojik yöntemlerle ön identifikasyonu yapıldı. Ön identifikasyonda şüpheli olarak tespit edilen izolatlar M. haemolytica spresifik primerlerin kullanıldığı Real-Time PCR yöntemi ile M. haemolytica olarak identifiye edildi. M. haemolytica izolatlarında belirlenen biyotipler BD PheonixTM otomatize bakteri identifikasyon sistemi ile tespit edildi. Çalışmada, elde edilen suşların virülens ile ilişkili olan O-sialoglikoproteaz (gcp), dış membran lipoproteini (gs60), transferrin bağlayan protein (tbpB), lökotoksin (lktC), UDP-N-asetil-D-glikozamin-2-epimeraz (nmaA) ve adhezyon (adh) genlerinin varlığı Real Time PCR ile belirlendi.

Bulgular: Ön identifikasyonda Mannheimia spp. şüpheli bulunan 55 izolatın 48’i Real-Time PCR ile M. haemolytica olarak identifiye edildi.

M. haemlytica suşlarında arginin ve sorbitol testlerindeki farklılık ve hayvanların sağlık durumları ile ilişkili 4 farklı biyotip tespit edildi. Araştırmada, dört ve daha fazla virülens ile ilişkili gen tespit edilen izolatlar virülens gen profili olarak değerlendirilirken az sayıda izolatta virülens gen profili belirlenemedi.

Sonuç: Yapılan bu çalışmada, arginin negatiflik ile gcp, gs60, tbpB, lktC, adh pozitif, nmaA negatif izolatların kommensal ve patojen M. haemolytica izolatlarının ayrımında kullanılabilecek epidemiyolojik kriter olabileceği ve konu ile ilgili yeni çalışmaların yapılması gerektiği sonucuna varıldı.

Anahtar kelimeler: Mannheimia haemolytica, virülens ile ilişkili gen, biyotip, Real Time PCR