Van kedisi eritrositlerinden karbonik anhidraz enziminin (E.C.4.2.1.1.) saflaştırılması ve karakterizasyonu

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Van Yüzüncü Yıl Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, KİMYA ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2006

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: MUHAMMED SÖYLER

Danışman: Halit Demir

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada Van Kedisi eritrositlerinden karbonik anhidraz (E.C.4.2.1.1.)enzimi afinite kromatografisi yöntemi ile saflaştırılmış ve karakterize edilmiştir. Buçalışma için alınan kedi kanı, antikoagulantlı tüplere konuldu. Gerekli santrifüj vediğer işlemler yapıldıktan sonra kolona uygulanacak hemolizat haline getirildi.Kolona uygulanacak hemolizatın pH'sı katı Tris ile dengeleme tamponunun pH'sıolan pH=8.7'ye ayarlandı. PH'sı ayarlanmış hemolizat aktifleşmiş Sepharose 4-B-L-tirozin-sülfanilamid afinite kolonuna uygulandı. Kolondan alınan fraksiyonlardanaktivite gösterenler, kantitatif protein tayinleri için Coomassie blue yöntemiyle ve 595nm'de yapıldı. Bunun yanı sıra enzimin optimum pH'sı, optimum sıcaklığı ve iyonikşiddet etkisi incelendi. Sonra SDS-Page Jel elektroforezi ile enzimin saflığı kontroledildi. Enzimin optimum pH'sı 8.0, optimum sıcaklığı 40 oC olarak bulundu. İyonikşiddetin etkisi üzerine yapılan çalışmada ise en yüksek aktivite 0.12 M (NH4)2SO4konsantrasyonunda görülmüştür.Enzimin saflık derecesi SDS-Page Jel elektroforezi ile kontrol edildi ve tekbant görülerek saflığı ispatlandı.