Research Information System
Van Yüzüncü Yıl Üniversitesi 3. Uluslararası Sağlık Bilimleri Kongresi, Van, Turkey, 12 - 13 December 2024, pp.105
Amaç:Bu arştırmada, Capoeta trutta (Heckel, 1843)veCapoeta umbla (Heckel, 1843) türlerinin karaciğer dokularında metallotionein (MT) protein düzeylerinin ölçümü amaçlandı.
Materyal ve Metot: Bu çalışmada, Murat Nehri’nde yaşayan Cyprinidae familyası üyesi C. umbla ve C. trutta türlerinden 20 adet yerel balıkçılardan satın alındı (n:10). Balık karaciğer doku örnekleri 0,6 g tartılarak fosfat tamponundan 6 ml eklenerek ultrasonik homojenizatörde ayrıştırıldı (pH 7.4). Plastik tüplere alınan karışım vortekslendi 4 °C’de soğutmalı santrifüjde 9500 rpm’de 30 dakika santrifüj edildi. Ependorf tüplere 1ml süpernatant aktarıldı. MT analizi için Sandwich-ELISA testi kullanıldı. Bu kitin test mikroplaka, teste özgü bir antikorla önceden kaplanmıştır. Standartlar ve örnekler sıraya göre mikroplaka kuyucuklarına eklenerek, spesifik antikorla birleşmesi sağlandı. Her bir mikroplaka kuyucuğuna Horseradish Peroksidaz (HRP) konjuge antikor eklendi, inkübe edildi ve bileşenler yıkandı. Her bir kuyucuğa TMB substrat çözeltisi eklendi. Ölçülen parametreyi ve parametrenin HRP konjuge antikorunu içeren kuyucuklar mavi renkte görünür ve stop çözeltisinin eklenmesi sonrasında sararır. Optik yoğunluk (OD), 450 nm dalga boyunda spektrofotometrik olarak ölçüldü. Numunelerdeki konsantrasyon, numunenin OD'sininin standart eğriyle karşılaştırılması ile hesaplandı.
Bulgular: MT düzeyleri C. trutta 0.373±0.006 µg/ml ve C. umbla 0.339±0.019 µg/ml türlerinin karaciğer dokularında ölçüldü (X±SEM Aritmetik ortalama ± Standart hata).
Sonuç: Bu çalışmada, C. trutta karaciğer dokusu MT düzeyi, C. umbla karaciğer MT düzeyine göre daha yüksek ölçüldü. Aynı familyadan olmalarına ve aynı ortak yaşam alanında yaşamalarına rağmen bu farklılık balıkların büyüme, gelişme ve beslenme farklılıklarından kaynaklı olabilir.
Anahtar Kelimeler:Capoeta trutta, Capoeta umbla,Metallotionein, Murat Nehri
Etik onay: Van Yüzüncü Yıl ÜniversitesiHayvan Deneyleri Yerel Etik Kurulu'nun 28.11.2019 tarih ve 2019/11 sayılı kararı.
Teşekkür: Bu çalışma, Van YYÜ Bilimsel Araştırma Projeleri Koordinasyon Birimi tarafından FYL-2020-9286 No’lu proje olarak desteklenmiştir.
Aim: The aim of this study was to measure metallothionein (MT) protein levels in liver tissues of Capoeta trutta (Heckel, 1843) and Capoeta umbla (Heckel, 1843) species.
Material and Method: In this study, 20 C. umbla and C. trutta species from the Cyprinidae family living in the Murat River were purchased from local fishermen (n: 10). Fish liver tissue samples were weighed as 0.6 g and separated into an ultrasonic homogenizer by adding 6 ml of phosphate buffer (pH 7.4). The mixture taken into plastic tubes was vortexed and centrifuged at 9500 rpm in a refrigerated centrifuge at 4 °C for 30 minutes. 1 ml of supernatant was transferred to Eppendorf tubes. The Sandwich-ELISA test was used for MT analysis. The test microplate of this kit is pre-coated with an antibody specific to the test. Standards and samples were added to the microplate wells to ensure that they combine with the specific antibody. Horseradish Peroxidase (HRP) conjugated antibody was added to each microplate well, incubated and components were washed. TMB substrate solution was added to each well. Wells containing the measured parameter and its HRP conjugated antibody appear blue and turn yellow after the addition of stop solution. Optical density (OD) was measured spectrophotometrically at 450 nm wavelength. Concentration in samples was calculated by comparing the OD of the sample with the standard curve.
Results: MT levels were measured in liver tissues of C. trutta 0.373±0.006 µg/ml and C. umbla 0.339±0.019 µg/ml (X±SEMArithmetic average ± Standard error).
Conclusion: In this study, C. trutta liver tissue MT levels were measured higher than C. umbla liver MT levels. Although they are from the same family and live in the same common habitat, this difference may be due to differences in growth, development and nutrition of the fish.
Key Words: Capoeta trutta, Capoeta umbla, Metallothionein, Murat River
Ethical Statement: Van Yuzuncu Yil University Animal Experiments Local Ethics Committee's decision dated 28.11.2019 and numbered 2019/11. Acknowledgement: This study was supported by Van YYU Scientific Research Projects Coordination Unit as project No. FYL-2020-9286