Akademik Veri Yönetim Sistemi
XIV. Ulusal Veteriner Mikrobiyoloji Kongresi (Uluslararası Katılımlı), Konya, Türkiye, 13 - 16 Ekim 2020, ss.41-44
Amaç: Bu
çalışmada sığır ve koyunların solunum yollarından izole edilen Mannheimia
(M.) haemolytica izolatlarının biyotipleri ve bazı önemli virülens ile
ilişkili genlerin dağılımının tespit edilmesi amaçlandı.
Yöntem:
Araştırmada 157 sığır ve 182 koyunun nazo-farengiyal ve trake-bronşiyal
bölgelerinden alınan toplam 650 svap örneğinin konvansiyonel bakteriyolojik
yöntemlerle ön identifikasyonu yapıldı. Ön identifikasyonda şüpheli olarak
tespit edilen izolatlar M. haemolytica spresifik primerlerin
kullanıldığı Real-Time PCR yöntemi ile M. haemolytica olarak identifiye
edildi. M. haemolytica izolatlarında belirlenen biyotipler BD PheonixTM otomatize
bakteri identifikasyon sistemi ile tespit edildi. Çalışmada, elde edilen
suşların virülens ile ilişkili olan O-sialoglikoproteaz (gcp), dış
membran lipoproteini (gs60), transferrin bağlayan protein (tbpB),
lökotoksin (lktC), UDP-N-asetil-D-glikozamin-2-epimeraz (nmaA) ve
adhezyon (adh) genlerinin varlığı Real Time PCR ile belirlendi.
Bulgular: Ön identifikasyonda Mannheimia spp. şüpheli bulunan 55 izolatın 48’i Real-Time PCR ile M. haemolytica olarak identifiye edildi. M. haemlytica suşlarında arginin ve sorbitol testlerindeki farklılık ve hayvanların sağlık durumları ile ilişkili 4 farklı biyotip tespit edildi. Araştırmada, dört ve daha fazla virülens ile ilişkili gen tespit edilen izolatlar virülens gen profili olarak değerlendirilirken az sayıda izolatta virülens gen profili belirlenemedi.
Sonuç: Yapılan
bu çalışmada, arginin negatiflik ile gcp, gs60, tbpB, lktC,
adh pozitif, nmaA negatif izolatların kommensal ve patojen M.
haemolytica izolatlarının ayrımında kullanılabilecek epidemiyolojik kriter
olabileceği ve konu ile ilgili yeni çalışmaların yapılması gerektiği sonucuna
varıldı.
Anahtar
kelimeler: Mannheimia haemolytica, virülens ile ilişkili gen,
biyotip, Real Time PCR
Aim: In this
study, it was aimed to determine the distribution of some important virulence-related
genes and the biotypes of Mannheimia (M.) haemolytica isolates isolated
from the respiratory tracts of cattle and sheep.
Method: In the
study, pre-identification of 650 swab samples taken from the naso-pharyngeal
and trachea-bronchial regions of 157 cattles and 182 sheeps was performed using
conventional bacteriological methods. Isolates found as suspicious in
pre-identification were identified as M. haemolytica by Real-Time PCR
method using M. haemolytica specific primers. Biotypes detected in M.
haemolytica isolates were determined with BDTM Phoenix automated bacterial
identification system. In the study, virulence-related O-sialoglycoprotease (gcp),
outer membrane lipoprotein (gs60), transferrin binding protein (tbpB),
leukotoxin (lktC), UDP-N-acetyl-D-glucosamine-2-epimerase (nmaA)
and adhesion (adh) genes of the obtained strains were determined by Real Time
PCR.
Findings:
In
pre-identification, 48 of 55 Mannheimia spp.'s isolates found suspicious
were identified as M. haemolytica by Real-Time PCR. In the isolates
examined, four different biotypes were determined in which the biochemical
properties associated with disease and virulence genes resulted from
differences in arginine-arginine and sorbitol tests. In the study, isolates
with four or more virulence-related genes were evaluated as virulence gene
profiles, while the virulence gene profile could not be determined in a small
number of isolates
Results: it was
concluded that arginine negativity and gcp, gs60, tbpB, lktC, adh positive,
nmaA negative isolates can be an epidemiological criterion that can be
used in the differentiation of commensal and pathogen M. haemolytica isolates
and new studies should be conducted on the subject.
Key
words: Mannheimia haemolytica, virulence-related gene,
biyotype, Real Time PCR